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液相色谱柱正确使用维护及再生

点击次数:2518 更新时间:2009-10-12

1、正确的使用方法
1)进样的试样称量,超声波溶解,样品过滤器过滤后进入色谱;
2)在有条件情况下,一个样品使用一支色谱柱,可延长柱使用寿命;
3)色谱柱在使用后必须冲洗干净后方可保存过夜;
4)对于使用酸、碱、缓冲盐的流动相,柱子必须用蒸溜水(含5%有机溶剂)冲洗干净,再用甲醇、乙腈冲洗保护(对反相柱)。
2
、色谱柱的维护
1)流动相所用试剂尽可能是色谱纯试剂,水是超纯水或全玻璃双重蒸溜水;
2)流动相使用前用溶剂过滤器除去可能存在的微粒,流动相应现用现配。对含盐的流液尤其应注意长时
间会产生细菌或出现沉淀;
3)柱子在使用过程中会产生:塔板数下降峰形变差压力增加保留时间变化。为使柱子使用寿命
延长
A
每天使用完后必须当天冲洗干净;
B
压力增大时,可能是过滤筛板污染,可以将柱头螺母卸下取出滤片并将其在20% 的硝酸溶液里超声波清洗约15 分钟,再用纯水超声波清洗10 分钟,重新装入色谱柱;
4)色谱柱的再生
A.
反相柱分别用甲醇:水=9010,纯甲醇,二氯甲烷做流动相依次冲洗,每次冲洗体积为柱体积
30 倍,然后以相反顺序冲洗;
B.
正相柱分别用正己烷,异丙醇,二氯甲烷,甲醇做流动相依次冲洗,每次为柱体积的30 倍,甲
醇冲洗完以后再以相反的次序冲洗,至正己烷。注意使用流动相必须严格脱水。

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